ساخت cdnaی نوترکیب ژن vegf-a با استفاده از آنزیم eco۳۱i

امروزه، سنتز cdnaی ژن های مختلف به طور گسترده در حوزه ی بیوتکنولوژی مطرح بوده و به دلیل کاربردهای زیاد cdna روش های متعددی برای رسیدن به این هدف پیشنهاد شده است. در ارتباط با بسیاری از ژن ها، همواره نیاز به یک روش ساده تر، سریع تر، دقیق تر و کم هزینه تر در راستای سنتز cdna آ ن ها مطرح بوده است. در مطالعه حاضر با استفاده از روش مبتنی بر آنزیم های نوع iis (eco31i) اگزون های تشکیل دهنده ایزوفرم vegf-111 از ژن vegf-a از طریق واکنش های pcr مجزا تکثیر شده و در نهایت پس از انجام واکنش های هضم آنزیمی و ligation، cdna ایزوفرم vegf-111 سنتز گردید. در این روش انجام مطالعات بیوانفورماتیکی و طراحی پرایمرهای ویژه به کمک نرم افزار الیگو7 از اهمیت بالایی برخوردار است. ایزوفرم vegf-111 در بافت های نرمال بیانی ندارد و تنها در لاین های سلولی خاصی که در معرض نور uv-b و یا گروهی از مواد ژنوتوکسیک قرار گرفته اند بیان می شود؛ بنابراین سنتز cdna آن از اهمیت ویژه ای برخوردار است. vegf-111 با توجه به ویژگی های رگ زایی قوی و مقاومت در برابر پروتئازهای سلولی به عنوان یک فاکتور درمانی نویدبخش در راستای درمان بیماری های ایسکمیک مطرح می گردد.